利用激光微束穿刺法获得抗黄萎病转基因棉花的研究

通过激光微束穿刺法,将β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达载体pBLGC导入棉花幼胚。转化一代棉花幼苗用蘸根法进行抗黄萎病筛选,将存活的苗移入病圃进行了卡那霉素(Kan 1%)抗性测定。结果表明,在移栽的29株幼苗中,有9株表现出明显的Kan抗性,对9株抗Kan植株进行了PCR检测,结果显示,其中7株表现为阳性。病圃中的T1代转基因植株在经历了黄萎病发病高峰期后,7株PCR阳性植株表现明显抗病,并已正常开花结铃,其他T1代植株及对照植株全部因后期发病死亡。这初步证明外源基因已整合到棉花基因组中,且使转基因植株对黄萎病表现出一定的抗性。