使用原子力显微镜在单个巨噬细胞上成像和测量Fcγ受体的生物物理特性

在效应细胞(例如NK细胞,巨噬细胞)上广泛表达的Fcγ受体(FcγR)在临床癌症免疫治疗中起重要作用。 FcγRs与附着于靶细胞的抗体的Fc部分的结合可激活抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)杀伤机制,从而导致靶细胞裂解。 在这项工作中,我们使用原子力显微镜(AFM)来观察细胞超微结构,并测量水性环境中单个巨噬细胞上FcγRs的生物物理特性(亲和力和分布)。 AFM成像用于获得巨噬细胞的形貌,揭示了纳米级细胞的精细结构。 为了进行分子相互作用识别,将抗体分子通过异双功能聚乙二醇(PEG)交联剂连接到AFM尖端上。 使用AFM单分子力光谱法,可在单个巨噬细胞上定量测量FcγRs的结合亲和力。 粘附力作图法用于定位FcγRs,揭示巨噬细胞局部区域上FcγRs的纳米级分布。 实验结果可以增进我们对巨噬细胞上的FcγRs的了解; 建立的方法将有助于进一步研究基于抗体的免疫疗法所涉及的生理活性。